全基因合成实验操作程序
以前,实验室通常用PCR和RT - PCR的方法来获取某个基因片段,但是往往因为标本和模板等原因无法钓取该段基因。如今,我们采用化学合成的方法人工构建基因片段,即:全基因合成拼接技术。可以为广大的科研朋友服务。
基因合成是指在体外合成双链DNA分子的一门技术与寡核苷酸合成有所不同,穿核苷酸是单链的,所能合成的长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。可根据客户需求,我公司可以提供全基因合成服务,速度快、周期短、*。合成的基因可以根据客户的需求连接到不同的载体上,终提供的产品包括菌株以及冻干的质粒和全基因完整的测序报告。
全基因合成的适用范围:
1.自然界中无法以常规实验手段得到的基因。
2.研究人员通过自己的意愿设计基因序列,以得到自然界中不存在的基因。
3.对已知基因序列进行大量密码子优化重排以期达到对该基因进行高效表达或获得新的生物特性等研究目的。
服务优势:
1.合成基因长已达到10 5KB,已完成基因超过10000条。
2.可以合成重复序列(重复次数无限制).高GC(小于80%).发夹(参照每200bp小于3个发夹为限)连续单-碱基重复(GC小于15个,AT小于20个)等富含特殊结构的基因注:特殊结构基因合成的相关数据是根据我公司曾经成功合成过的基因序列所做的总结,以作为您设计基因序列时判断是否能顺利合成作为参考具体还需以实际基因序列来定。
3、基因可以克隆到客户提供或的表达载体上。
4.免费提供基因结构设计基因密码子优化,基因克隆表达方案设计等基因合成相关咨询服务。
全基因合成操作程序:
1.我们将对您需要合成的基因全序列进行分析,检查基因内部是否含有重复序列,然后根据序列的具体情况设计合成方案。
2.在得到您认可后,我们将立即进行单链Oligo DNA合成,DNA+#片段拼接等工作。然后把全长基因克隆到载体中,再通过DNA测序确认合成基因的正确性。
3.测序结果如果发现有错误位点。我们会采取相应的技术手段进行修复校对,保证整个序列的正确性。
注:因基因结构比较复杂,并非所有的片段都能顺利合成。对于较长的片段或一些复杂结构如重复序列、高GC片段等,可能会需要额外的时间调整合成方案。如果发生这种情况,技术人员会及时与您联系,告知您合成进程。所合成的基因- 般克隆于通用载体中,如需克隆在客户的载体中,我公司会酌情再收取一定的费用,并且交货时间会适当延长。
服务要求:
1.请您以邮件、书面的形式提供需要合成的基因的序列。
2.请您说明实验的具体要求:
如:使用何种酶切位点,进行克隆,以及需要克隆到何种载体等。
3、本中心将免费提供PUC57 - T载体,如果需要装在其它载体中,请客户自己提供。
4.签订基因台成技术保密协议,支付合成总价的50%作为预付款,本公司收到款项后开始合成基因注:基因合成开始日期为公司确认收到预付款后的第--个工作日
5、基因合成结束,通知客户支付余下50%的合成款项
结果提供:
1.基因合成报告单一份
2.含目的基因的质粒(不少于1ug)-份
3、含目的基因的菌株- -份
4.基因合成的测序图谱- -份
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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实验代做服务:
ELISA试剂盒免费代检测 | CCK8检测 | 基因组DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot | 免疫组化 | 荧光定量PCR | 动物模型服务 |
流式细胞检测 | ROS氧化分析 | 激光共聚焦 | DNA甲基化实验 |
细胞划痕 | 钙离子浓度检测 | 扫描电镜实验 | microRNA测序 |
动物实验 | 探针合成 | ATP/ADP检测 | 石蜡/冰冻切片 |
定点突变 | 线粒体膜电位(MMP)检测 | 细胞生长曲线的测定 | 药理毒理动物实验
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免疫共沉淀 | 真核表达载体构建 | 染色质免疫沉淀CHIP | 非标定量(Label-free)实验 |