刚果红染色实验服务
刚果红的原理:
刚果红筛选主要是根据菌落降解纤维素可以形成降解圈,氯化钠冲洗再烘干后可以让降解圈看的更清楚更易观察、它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应在含有纤维素的培养基中加入刚果红染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明因。
刚果红染色法的使用:
方法一先培养微生物,再加入刚果红进行焰色反应在长出菌落的培养基上,覆盖质量浓度为1 mg/ml.的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物质的量浓度为I mol/的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCI溶液,此时,产生纤维素酶的菌落周围将会出现透明圈。
(加NaCI的原因:刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产纤维素酶,能分解这个多糖底物成为赛糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大小不--的透明圈, 大的透明圈分解纤维素的能力就强)。
方法二,在倒平板时就加入刚果红配制质量浓度为10 mg/ml的CR溶液,灭菌后,按照每200 ml。培养基加入1 ml。的比例加入CR溶液,混匀后倒平板。等培养基上长出茵落后,产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。
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